小鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒性能：

【實(shí)驗(yàn)方法】：雙抗體一步夾心法

【檢測范圍】：請咨詢我司銷售人員領(lǐng)取新說明書

【靈敏度】：zui低檢測濃度小于1.0μmol/L

【特異性】：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)

【重復(fù)性】：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

小鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒常見樣本處理及要求：

【血清】：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【血漿】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【細(xì)胞培養(yǎng)物上清】：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個(gè)月內(nèi)檢測），或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融，標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

【ELISA檢測試劑盒常見問題解答】為了幫助您更好的解決在實(shí)驗(yàn)中可能碰到的各種問題，上海軒澤康生物設(shè)計(jì)了這些問題指導(dǎo)，配以試劑盒內(nèi)的說明書一起供您參考使用：

1.     問：ELISA試劑盒是否可以分批使用？

上海軒澤康生物解析：可以分批使用，試劑盒內(nèi)酶標(biāo)板都是可拆卸的。

2.     問：ELISA實(shí)驗(yàn)整個(gè)過程需要多久？

上海軒澤康生物解析：從實(shí)驗(yàn)方法來看，雙抗體夾心法實(shí)驗(yàn)需要約3.5~4小時(shí)，競爭法實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時(shí)。這個(gè)時(shí)間是單純的上機(jī)時(shí)間，不包括樣本采集時(shí)間和樣本處理時(shí)間。

3.     問：說明書上的檢測限不適用怎么辦？

上海軒澤康生物解析：我們的試劑盒檢測限都是根據(jù)常規(guī)樣本定標(biāo)，如遇低于檢測限的特殊樣本可以聯(lián)系我司客服咨詢定制檢測限。

4.     問：為什么建議樣本和標(biāo)曲做復(fù)孔？

上海軒澤康生物解析：①求平均值，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。②防止跳孔。③對自己的操作進(jìn)行評估。④對試劑盒性能進(jìn)行評估。

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