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淺析β干擾素(IFN-β)LISA試劑盒的標本要求及原理

更新時間:2023-02-13 瀏覽次數(shù):746

  β干擾素(IFN-β)是一種多肽,通常由成纖維細胞產(chǎn)生,具有抗病毒和抗增殖的作用。IFN-β與它的受體結(jié)合,誘導出復雜的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。在免疫細胞中(IFN-β在多發(fā)性硬化癥中最可能的治療效果的目標),IFN-β減少抗原呈遞和T細胞增殖,改變細胞因子和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)表達,并恢復抑制功能。IFN-β的治療形式可以在細菌表達系統(tǒng)(IFN-beta1b)或哺乳動物細胞(IFN-beta1a)中產(chǎn)生。
 
  β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的標本要求:
 
  1、標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。
 
  2、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
 
  β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的實驗原理:
 
  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人β干擾素(IFN-β)水平。用純化的人β干擾素(IFN-β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β干擾素(IFN-β),再與HRP標記的β干擾素(IFN-β)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β干擾素(IFN-β)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人β干擾素(IFN-β)濃度。

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